熱門詞:恒溫培養箱馬弗爐|網站首頁|在線留言|聯系我們

歡迎來到上海喆圖科學儀器有限公司

上海喆圖科學儀器有限公司

上海喆圖科學儀器有限公司

產品分類展示

生化培養箱

霉菌培養箱

恒溫恒濕培養箱

光照培養箱

人工氣候箱

二氧化碳培養箱

多功能二氧化碳培養箱

電熱恒溫培養箱

隔水式恒溫培養箱

鼓風干燥箱

立式鼓風干燥箱

高溫鼓風干燥箱

真空干燥箱

數顯真空度干燥箱

熱空氣消毒箱/干烤滅菌器

干燥培養兩用箱

電熱恒溫水槽

電熱恒溫水浴鍋

低溫恒溫槽

電熱恒溫加熱板

一體式馬弗爐

氣浴恒溫振蕩器

恒溫振蕩器

低溫培養箱

恒溫恒濕箱(專業型)

厭氧培養箱

冷阱

精密鼓風干燥箱

遠紅外干燥箱

箱式電阻爐

陶瓷纖維馬弗爐

藥品穩定性試驗箱

高低溫(交變)試驗箱

高低溫(交變)濕熱試驗箱

培養搖床

數顯石墨加熱板

水浴恒溫振蕩器

恒溫恒濕稱重系統

熔噴布烘箱

聯系我們

上海喆圖科學儀器有限公司
上海喆圖科學儀器有限公司

電話:021-80158181-103

傳真:021-58582778-8002

QQ:123417331

E-MAIL:jiangjinhong@zhetu.cn

手機:17321198802

地址:上海市浦東新區瑞慶路528號18幢(張江高科現代醫療器械園)

您現在位置:首頁 » 技術文章
細胞傳代的操作步驟
發布時間:2019-03-14   點擊次數:397次

        喆圖小編今天來講講細胞傳代的操作步驟:需要準備的器材:酒精噴壺、PBS緩沖液、胰酶、培養基、巴氏吸管、水浴鍋、移液器、離心管、超凈臺、CO2培養箱、離心機等。

        然后我們要把我們準備的器材放入超凈臺,打開紫外殺菌燈滅菌,需要注意的是若培養的細胞對溫度比較敏感,將培養基瓶子放入37℃的水浴鍋中,使得培養基溫度在37℃,再轉移到超凈臺紫外滅菌,當然一般的細胞對培養基的溫度不是很敏感,不用對培養基加溫也是可以的。細胞培養間也需要紫外照射半小時左右。

        接下來小編就開始來操作了,全程嚴格無菌操作!

        1、紫外照射滅菌后,穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩。

        2、從CO2培養箱中取出細胞培養瓶,用酒精噴壺在培養瓶表面噴灑75%酒精消毒,轉移培養瓶到超凈臺。

        3、打開蓋子,輕輕吸出舊的培養液,用巴氏吸管加入適量PBS緩沖液洗滌1-2次,棄去PBS緩沖液。

        4、可用移液器加入2-3ml胰酶,“十字”晃動,使胰酶充分接觸細胞。

        5、將加入胰酶的細胞培養瓶轉移到倒置顯微鏡載物臺,鏡下觀察細胞消化情況,當細胞變圓且大量脫落時,準備終止消化,用75%的酒精噴灑培養瓶表面,轉移到超凈臺

        6、用移液器加入等量含血清培養基,終止消化。移液器充分吹打,使細胞能夠完全脫落。

        7、將培養瓶中混合液體轉移至離心管中,配平,離心5分鐘左右。

        8、離心好后,用酒精噴壺噴灑離心管表面,轉移進超凈臺,打開蓋子,將上清液倒入廢液缸。

        9、加入適量體積含血清培養基,用移液器或巴氏吸管輕輕吹打,制成細胞懸液。

        10、將細胞懸液分裝進3個潔凈滅菌培養瓶,加入適量培養基,蓋好蓋子

        11、將分裝好的培養瓶置于倒置顯微鏡載物臺,觀察細胞情況,細胞應保證一定數量,數量太少會影響生長情況。

        12、在培養瓶上做記號,注明傳代時間,細胞種類,操作人員等信息。在放入CO2培養箱之前應再次用酒精噴一噴培養瓶表面,然后整理操作臺,用75%酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。

        以上內容僅供參考,如需了解請聯系喆圖客服!

分享到:

返回列表 | 返回頂部
收縮
  • QQ咨詢

  • 在線咨詢
  • 點擊這里給我發消息
  • 點擊這里給我發消息
  • 點擊這里給我發消息

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
高清无码在线观看_日本一本二本_免费人做人爱完整版视频在线_日韩欧美在线综合网