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菌類多糖提取
發布時間:2019-04-23   點擊次數:849次

       今天喆圖小編來講講金針菇多糖提取所需試劑儀器設備:蒸餾水、纖維素酶、無水乙醇、、正丁醇、氯化鈉、三氯一酸、氫氧化鈉 、鼓風干燥箱、濃縮裝置、離心機、真空烘箱、冰箱、色譜柱、冷凍干燥機 


       操作過程:原料-預處理--酶解--浸提--濃縮--醇析--脫蛋白--干燥--多糖純品--精制--多糖精品 
       (1)原料 :新鮮金針菇   
       (2)預處理:新鮮金針菇65°C放入鼓風干燥箱烘干6h制成干品,將金針菇子實體干品粉碎,粉碎粒度為3--5mm,粉碎后裝入容器中加入2倍質量的水,在90-95°C條件下加熱處理10-15min,得到金針菇子實體勻漿 
       (3)酶解 :向勻漿中加入0.15%的纖維素酶以破壞金針菇子實體的細胞壁,使多糖釋放出,來,酶解溫度40°C ,ph為4,5時間為3h 
       (4)浸提:向容器中加入20倍樣品質量的水,在100°C,ph6.5的條件下浸提1h,過濾并收集濾液 
       (5)濃縮 :將濾液在40°C壓力0.2MPa條件下濃縮至原體積是我1/3 
       (6)醇析 :向濃縮液中加入無水乙醇至乙醇含量為70%,可以看到有沉淀析出,靜置一段時間至沉淀完全析出,在離心分離,收集沉淀,并于鼓風干燥箱中烘干得到多糖粗品 
       (7)純化脫蛋白質 : 將多糖粗品按樣品與氯方-正丁醇(氯方-正丁醇之比為1:0.2)之比為1:0.25復溶并進行充分震蕩,可將游離蛋白變性成為不容性物質,經離心分離去除,此過程通常反復進行5-8次,每次震蕩30min,才能很好的去除蛋白質,除蛋白后的多糖溶液進行真空干燥,即可得到純多糖產品 
       (8)精制:粗多糖粉末溶于0.1mol/L的氫氧化鈉溶液中,至于5-8°C低溫保存箱冷置12h,離心棄去沉淀、濾液加入40%的三氯一酸使之達到8%的含量,再置于低溫冰箱中5-8°C冷置12h離心,將沉淀加入0.1mol/L氯化鈉溶液洗脫分離,用硫酸-苯酚跟蹤檢測,收集(收率約為45%)多糖組分的母液,再取母液以0.1mol/L的氫氧化鈉溶液中和至ph6.5-7.0,然后將上述洗脫液適當濃縮,蒸餾透析后,在用色譜分離純化。用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液洗脫。收集洗脫液的糖樣 

       (9)精品  :  將此糖樣經減壓濃縮后,冷凍干燥得到的白色粉末狀金針菇多糖精品。

         以上內容僅供參考!

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