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堿性蛋白酶
發布時間:2019-04-25   點擊次數:305次

         喆圖小編來給大家講講實驗目的如酶類的生產,建立合適、的篩選模型,并從特定的樣品如海泥中篩選出高產菌株。
實驗所需儀器設備:滅菌鍋,電熱恒溫培養箱,恒溫搖床,玻璃儀器
         需準備的培養基 A.富集培養基(液體):海水2216E 液體培養基、蛋白胨5.0,酵母粉1.0,陳海水1L,pH7.6。取50mL 分裝250mL 三角瓶后,8層紗布封口,外包1層牛皮紙, 115℃高溫滅菌30min。 B. 2216E 斜面(固體):
         海水2216E 液體培養基中加入2%的瓊脂粉,加熱溶化瓊脂,每支試管內加入5mL,115℃高溫滅菌30min,滅菌后擺斜面。

無菌生理鹽水:NaCl 0.85% 去離子水配制。每支試管加入4.5mL,蓋上試管帽、包扎、115℃高溫滅菌30min。
         堿性蛋白酶篩選培養基:海水2216E-脫脂奶粉平板:

     A:4%脫脂奶粉,蒸餾水;

     B:海水2216E 液體培養基中加4%瓊脂粉,pH10.0。A 和B 115℃高溫滅菌30min 后稍冷卻,將A在無菌超凈臺中倒入B中,搖勻后倒入無菌平板。

         取少量海泥樣品加入富集培養基中,28℃,150rpm 于恒溫振蕩培養24個小時。

         搖勻富集后的富集培養液,用無菌生理鹽水作梯度稀釋至10-5、10-6后各涂1個篩選平板, 在28℃電熱恒溫培養箱中培養48 小時。
         產蛋白酶菌株的篩選
         觀察篩選平板上所產生的水解圈,拍照。每組選取1株水解圈大而明顯的菌株,接在斜面上培養。

         以上內容僅供參考,如需了解詳情請聯系喆圖客服!

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