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枸杞多糖測定
發布時間:2019-05-06   點擊次數:569次

        枸杞子,為茄科植物枸杞的成熟果實。夏、秋果實成熟時采摘,除去果柄,置陰涼處晾至果皮起皺紋后,再暴曬至外皮干硬、果肉柔軟即得。遇陰雨可用干燥箱烘干。

        枸杞子具有多種保健功效,是衛生部批準的藥食兩用食物。適量食用有益健康,配合菊枸茶有清肝明目的效果。

        原理
        用80%乙醇溶液提取以除去單糖、低聚糖、甙類及生物堿等干擾性成分,然后用水提取其中所含的多糖類成分。多糖類成分在硫酸作用下,先水解成單糖,并迅速脫水生成糖醛衍生物,然后和苯酚縮合成有色化合物,用分光光度法于適當波長處測定其多糖含量。
        儀器和設備
        實驗室用樣品粉碎機。
        分析天平,感量0.0001g.
        分光光度計,用10mm比色杯,可在490nm下測吸光度。
        玻璃回流裝置。
        電熱恒溫水槽。
        現玻璃儀器,250mL容量瓶、各規格移液管、25mL具塞試管。
        試劑配制
        除非另有說明,在分析中僅使用確認為分析純的試劑和GB/T6682中規定的至少三級的水。
180%乙醇溶液:用95%乙醇或無水乙醇加適量水配制。
        硫酸。
        苯酚液:取苯酚100g,加鋁片0.1g與碳酸氫鈉0.05g,蒸餾收集172℃餾分,稱取此餾分10g,加150mL,置于棕色瓶中即得。
        試樣的選取和制備
        取具有代表性試樣200g,用四分法將試樣縮減至100g,粉碎至均勻,裝于袋中置干燥皿中保存,防止吸潮。
        測定步驟
樣品溶液的制備

        準確稱取樣品粉末0.4g(到0.0001g),置于圓底燒瓶中,加80%乙醇溶液200mL,回流提取1h,趁熱過濾,燒瓶用80%熱乙醇溶液洗滌3次~4次,殘渣用80%熱乙醇溶液洗滌8次~10次,每次約10mL,殘渣用熱水洗至原燒瓶中,加水100mL,加熱回流提取1h,趁熱過濾,殘渣用熱水洗滌8次~10次,每次約10mL,洗液并入濾液,冷卻后移人250mL容量瓶中,用水定容,待測。
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        GB/T18672一2014
        標準曲線的繪制
        準確稱取105℃干燥恒重的標準葡萄糖0.1g(到0.0001g),加水溶解并定容至1000mL。準確吸取此標準溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL分置于具塞試管中,各加水至2.0mL,再各加苯酚液1.0mL, 搖勻, 迅速滴加硫酸5.0mL, 搖勻后放置5min, 置沸水浴中加熱15min, 取出冷卻至室溫; 另以水2mL加苯酚和硫酸,同上操作為空白對照,于490nm處測定吸光度,繪制標準曲線。
        試樣的測定
        準確吸取待測液一定量(視待測液含量而定),加水至2.0mL,以下操作按標準曲線繪制的方法測定吸光度,根據標準曲線查出吸取的待測液中葡萄糖的質量。

 

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