熱門詞:恒溫培養箱馬弗爐|網站首頁|在線留言|聯系我們

歡迎來到上海喆圖科學儀器有限公司

上海喆圖科學儀器有限公司

上海喆圖科學儀器有限公司

產品分類展示

生化培養箱

霉菌培養箱

恒溫恒濕培養箱

光照培養箱

人工氣候箱

二氧化碳培養箱

多功能二氧化碳培養箱

電熱恒溫培養箱

隔水式恒溫培養箱

鼓風干燥箱

立式鼓風干燥箱

高溫鼓風干燥箱

真空干燥箱

數顯真空度干燥箱

熱空氣消毒箱/干烤滅菌器

干燥培養兩用箱

電熱恒溫水槽

電熱恒溫水浴鍋

低溫恒溫槽

電熱恒溫加熱板

一體式馬弗爐

氣浴恒溫振蕩器

恒溫振蕩器

低溫培養箱

恒溫恒濕箱(專業型)

厭氧培養箱

冷阱

精密鼓風干燥箱

遠紅外干燥箱

箱式電阻爐

陶瓷纖維馬弗爐

藥品穩定性試驗箱

高低溫(交變)試驗箱

高低溫(交變)濕熱試驗箱

培養搖床

數顯石墨加熱板

水浴恒溫振蕩器

恒溫恒濕稱重系統

熔噴布烘箱

聯系我們

上海喆圖科學儀器有限公司
上海喆圖科學儀器有限公司

電話:021-80158181-103

傳真:021-58582778-8002

QQ:123417331

E-MAIL:jiangjinhong@zhetu.cn

手機:17321198802

地址:上海市浦東新區瑞慶路528號18幢(張江高科現代醫療器械園)

您現在位置:首頁 » 技術文章
原代細胞培養中的六個錯誤做法
發布時間:2019-06-05   點擊次數:548次

       原代細胞培養與細胞株不同,兩者在培養過程中的操作方法也不一樣。這里對原代細胞操作過程中容易出現的6個錯誤及對應方法做一個說明。
       1.長時間水浴解凍
       因為原代細胞非常容易受到解凍過程的影響,所以在37℃水浴鍋中解凍時,要在水中擺動溶解。在細胞半溶后(不要等到全部溶解),迅速拿到生物安全柜或超凈臺中,用1ml的槍,抽出事先準備好的完全培養基打入凍存管中,然后抽到培養瓶中,反復進行,直至完全溶解。

        2.把凍存管的細胞溶解后迅速離心
       如果原代細胞溶解后馬上離心,細胞所受的打擊可能比DMSO的毒性還要大,不建議采用這個方法。用帶有血清的完全培養基溶解后鋪瓶,第二天換液去除DMSO。
       3.讓原代細胞長滿(100%)瓶(皿、板)
       原代細胞長滿后,細胞會出現老化。因為原代細胞不是100%的細胞團,把混入的細胞控制在MAX小限度非常重要。建議細胞長到90-95%進行傳代
       4.傳代時用大量的胰蛋白酶處理
       原代細胞傳代時,要用低濃度的胰蛋白酶消化,在顯微鏡下看到細胞開始變圓、脫落后迅速終止胰蛋白酶。建議采用含10%血清的完全培養基終止或大豆由來的蛋白酶終止劑終止。
       5.細胞培養后再凍存
       原代細胞再凍存后,細胞會老化、也可能引起機能變化,所以不建議再凍存。細胞再凍存也是細胞死傷的主要原因。
       6.原代細胞無限增殖
       原代細胞和細胞系不同,增殖能力是有限的。為了防止遺傳上的變化,建議盡快開始做實驗。另外,為了防止混入雜細胞比例的增加,要經常觀察細胞形態。

分享到:

返回列表 | 返回頂部
收縮
  • QQ咨詢

  • 在線咨詢
  • 點擊這里給我發消息
  • 點擊這里給我發消息
  • 點擊這里給我發消息

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
高清无码在线观看_日本一本二本_免费人做人爱完整版视频在线_日韩欧美在线综合网